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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于原核表达诱导条件
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jinnini125

木虫 (小有名气)

[求助] 关于原核表达诱导条件 已有3人参与

本人用的是全式金的原核表达载体，根据说明书37度诱导，设置时间梯度3.4.5三个梯度，IPTG浓度设置0.6 0.8 1.0三个梯度。未诱导的作为对照跑SDS-PAGE胶，结果如图。目的条带大约26KD，MARKER指示带倒数第一是20KD左右，第二是29KD左右。

关于原核表达诱导条件


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1楼 2017-03-23 19:38:17
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

楼主阴性那，第一次做的蛋白都要跑阴性的，也可能全都不是呀。
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采菊东篱下，悠然见南山。
9楼2017-03-27 11:24:32
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
从左到右都是什么？

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jinnini125
2楼2017-03-23 22:33:54
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
诱导温度只有37度？可以16度，28度啊

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jinnini125
3楼2017-03-23 22:34:53
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-05-09 22:15:38
应该是表达了，你收集菌体，裂解一下，分别跑一个裂解液上清和沉淀看是包涵体还是可溶性表达，一般情况下不用摸时间和IPTG浓度和温度梯度，37℃，4到6小时，iptg1mm就可以，做多了只是增加工作量，如果是包涵体表达，就需要考虑前面的因素了，你跑的这个胶没有太大意义，连未诱导的对照也没有，所以没法给你建议，做实验一定要设置阴性对照

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jinnini125
4楼2017-03-23 23:17:24
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