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bluebluemay

金虫 (小有名气)

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[交流] 关于HPLC的小问题

最近做高液，遇到不少杂七杂八的问题。我的流动相是40%水，60%乙腈，在最开始从100%乙腈开始平衡的时候，基线一直下降，但只有0.00几的波动，这个现象是否正常？是否可以认为我样品出峰高，这0.00几的波动可以忽略不计？另外，在我用几个比例的流动相逐步平衡柱子到我想要的流动相比例的时候，都会在1min多出现一个波动，这个波动是什么原因造成的？会不会是我柱子不干净？

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1楼 2017-03-11 21:47:27

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FRGOGO

新虫 (正式写手)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by bluebluemay at 2017-03-12 15:17:36
柱子是封装在乙腈中的，我的流动相是60%乙腈，40%水，不是应该设置几个中间比例，逐步提高水的比例么？比如先纯乙腈平衡20min，再80%乙腈，20%水，平衡20min，最后用60%乙腈，40%水平衡，20min基线平稳后进样。
...

用完柱子之后，如果流动相里没有盐就用100%乙腈冲半个小时，是为了把一些强保留物质洗脱下来，，你的柱子如果是新柱子，直接用流动相平衡就可以了，如果是旧柱子，别人用完也肯定冲过了，，你就不用冲了，直接用初始比例流动相平衡就ok了

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