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bluebluemay

金虫 (小有名气)

[交流] 关于HPLC的小问题

最近做高液,遇到不少杂七杂八的问题。我的流动相是40%水,60%乙腈,在最开始从100%乙腈开始平衡的时候,基线一直下降,但只有0.00几的波动,这个现象是否正常?是否可以认为我样品出峰高,这0.00几的波动可以忽略不计?另外,在我用几个比例的流动相逐步平衡柱子到我想要的流动相比例的时候,都会在1min多出现一个波动,这个波动是什么原因造成的?会不会是我柱子不干净?
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匿名

禁虫 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★
bluebluemay: 金币+5, 感谢建议~ 2017-03-12 11:12:30
本帖仅楼主可见
2楼2017-03-11 22:20:52
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yuanhulu123

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bluebluemay: 金币+5, ok 2017-03-12 11:12:48
这个是正常现象,没关系的

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3楼2017-03-12 08:03:46
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FRGOGO

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你流动相60%乙腈,为什么用纯乙腈来平衡柱子??还有,你用几个比例的流动相平衡柱子是指一个比例平衡一会儿然后改比例再平衡?如果是这样肯定会有峰除开的,那是梯度峰,,,你为啥要换着比例平衡柱子呢

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Fighting~
4楼2017-03-12 14:55:19
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bluebluemay

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by FRGOGO at 2017-03-12 14:55:19
你流动相60%乙腈,为什么用纯乙腈来平衡柱子??还有,你用几个比例的流动相平衡柱子是指一个比例平衡一会儿然后改比例再平衡?如果是这样肯定会有峰除开的,那是梯度峰,,,你为啥要换着比例平衡柱子呢
...

柱子是封装在乙腈中的,我的流动相是60%乙腈,40%水,不是应该设置几个中间比例,逐步提高水的比例么?比如先纯乙腈平衡20min,再80%乙腈,20%水,平衡20min,最后用60%乙腈,40%水平衡,20min基线平稳后进样。

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5楼2017-03-12 15:17:36
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FRGOGO

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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5楼: Originally posted by bluebluemay at 2017-03-12 15:17:36
柱子是封装在乙腈中的,我的流动相是60%乙腈,40%水,不是应该设置几个中间比例,逐步提高水的比例么?比如先纯乙腈平衡20min,再80%乙腈,20%水,平衡20min,最后用60%乙腈,40%水平衡,20min基线平稳后进样。
...

用完柱子之后,如果流动相里没有盐就用100%乙腈冲半个小时,是为了把一些强保留物质洗脱下来,,你的柱子如果是新柱子,直接用流动相平衡就可以了,如果是旧柱子,别人用完也肯定冲过了,,你就不用冲了,直接用初始比例流动相平衡就ok了

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Fighting~
6楼2017-03-12 17:15:34
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bluebluemay

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by FRGOGO at 2017-03-12 17:15:34
用完柱子之后,如果流动相里没有盐就用100%乙腈冲半个小时,是为了把一些强保留物质洗脱下来,,你的柱子如果是新柱子,直接用流动相平衡就可以了,如果是旧柱子,别人用完也肯定冲过了,,你就不用冲了,直接用初 ...

got it,每次用之前和用完都会设置几个比例的流动相来冲一下柱子,看来用之前那样冲是没必要了。

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7楼2017-03-12 17:52:16
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