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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 3%琼脂糖凝胶电泳点样量
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1007251466

新虫 (初入文坛)

[求助] 3%琼脂糖凝胶电泳点样量 已有1人参与

如果我用3%的琼脂糖凝胶，500ng/ul的质粒酶切用10ul的体系，载体2700，目的片段1700，怎样点样才能让目的片段的条带能看清，又比较细

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1楼 2016-12-23 08:43:49
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爱看小虎牙

金虫 (正式写手)
我也想知道！

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2楼2016-12-23 10:14:42
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据你的需要，我认为你用1%的琼脂糖凝胶就足够了。可以选择用4500bp左右的marker，如果是10μL的体系，可以选择用中孔的胶，足以加入20μL样品的体积。10μL酶切产物加入2μL loading buffer 混匀，点上marker，直接点样，跑胶回收就可以了。如果用3%的琼脂糖，一是没有必要，二是跑胶跑的太慢。希望能够帮助你。
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3楼2016-12-23 10:21:55
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C小杨

新虫 (初入文坛)
3%的胶浓度太大。可能会导致条带跟载体分不开哦，那年为了让200多bp的目的片段看的清晰，用3%的胶，结果载体大约12k的骨架跟Maker的2k带差不多位置。
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4楼2016-12-23 17:23:25
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1007251466

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-23 10:21:55
根据你的需要，我认为你用1%的琼脂糖凝胶就足够了。可以选择用4500bp左右的marker，如果是10μL的体系，可以选择用中孔的胶，足以加入20μL样品的体积。10μL酶切产物加入2μL loading buffer 混匀，点上marker，直 ...

谢谢，不过我们实验室没有哪种marker

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5楼2016-12-23 23:21:25
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