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jinnini125木虫 (小有名气)
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克隆启动子的方法
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目前只拿到了三个基因的开放阅读框，没有全长，如何拿到基因的启动子？基因组步移？TRIL PCR？谁具体操作过？指点一二，谢谢。 发自小木虫IOS客户端 |
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-17 11:08:09
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先买个基因组试剂盒，用来提取细胞的基因组DNA，然后在PUBMED上设计该基因的启动子去，一般为转录起始位点上游2000，下游1000个bp，设计一对引物合成，用基因组DNA扩增启动子区就好了 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-12-17 11:00:30
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提取植物细胞DNA，然后设计引物扩增就好了？关键是我的作物没有任何参考序列，没有基因组没有转录组。如何设计引物？ 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2016-12-17 11:05:40
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那买genome walking的试剂盒就好，TAKARA就有的，按照试剂盒操作，主要是设计三条高退火温度的特异引物与试剂盒里的四条低退火温度非特异引物进行热不对称PCR 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-12-17 11:15:35
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7楼2016-12-17 11:44:00
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