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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 坛子里有做水稻的吗？问下水稻克隆方面的经验。
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hubohuna

新虫 (初入文坛)

[求助] 坛子里有做水稻的吗？问下水稻克隆方面的经验。

以前没做过水稻，最近在分段连一个5k的启动子，前面3k已经连上去了，后面2k怎么也连不上，不知道什么原因，用的方法是沉淀的方法，没有切胶，不知道是不是水稻基因组本身的原因？
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1楼 2013-01-09 16:42:34
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hubohuna

新虫 (初入文坛)
求帮助~~~
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2楼2013-01-09 16:46:04
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hubohuna

新虫 (初入文坛)
老是连不上都快崩溃了，水稻克隆和拟南芥克隆有什么区别吗？
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3楼2013-01-09 19:58:47
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hubohuna

新虫 (初入文坛)
求指教a
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4楼2013-01-10 12:01:42
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个问题本身就是分子克隆的问题，跟水稻没有关系
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-01-10 14:24:09
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hubohuna

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-10 14:24:09
你这个问题本身就是分子克隆的问题，跟水稻没有关系

你们实验室水稻克隆和拟南芥是一套体系吗？
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6楼2013-01-10 16:42:26
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hubohuna

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-10 14:24:09
你这个问题本身就是分子克隆的问题，跟水稻没有关系

或者说有什么类似于水稻基因组快速克隆之列的protocol吗？
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7楼2013-01-10 16:43:57
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
反复检查一下前面的3K吧，确认前面连上的完全正确，再进行下一步工作。
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8楼2013-01-11 14:28:19
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XOooZzz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
基因克隆，水稻和拟南芥没区别
你的片段是先克隆到T载体再拼接起来的？已经连上的3K和后面的2K有没有测序验证？你用的都是什么连接方法？传统酶切？topo？A-T？GoldenGate？Gateway？
lz请尽量多地提供信息，别人才能给你分析。
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9楼2013-01-11 16:20:42
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