24小时热门版块排行榜    

查看: 1069  |  回复: 3

熙玥

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子克隆 已有3人参与

各位大虾,我现在在克隆梅子这类植物中的一个品种的启动子,而现在已经测序得到了另外一个品种的基因组序列,我就以测序得到的序列为引物设计模版,希望得到我手上材料的启动子,但是试了很多次都没有得到,我想知道是不是这种方法不对,只能用TALL-PCR这种方法才行?谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-25 10:40:27
熙玥: 金币+2 2014-04-09 13:14:06
Tail-PCR可以获得对应序列,你也可以通过你已知序列做inverse-PCR
hehe
2楼2014-03-25 08:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytetyio09

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-25 10:40:37
熙玥: 金币+5 2014-04-09 13:14:15
可以试试这篇论文的方法,虽然是个小的改进,但是确实有效:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256
3楼2014-03-25 09:37:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjzyfx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-25 10:40:54
熙玥: 金币+2 2014-04-09 13:14:21
完全可以根据已有的序列克隆其他品种的启动子,你扩增不出来有可能是很多原因,不如引物不好,PCR体系不好等等,多设计引物试试,利用Tail-PCR也可以,但是这些方法随机性很大
迷茫的蚊子
4楼2014-03-25 10:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 熙玥 的主题更新
信息提示
请填处理意见