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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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z631535213

木虫 (正式写手)

[求助] 扩增10、20个循环各需要引物多少? 已有3人参与

楼主需要在体系里加入两对引物,一对扩增前10(20)个循环,另外一对扩增剩下的循环次数(总共40个循环)。引物已稀释成10uM,想请教下扩增10(20个循环)需要多少的引物量

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晓来林醉

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
z631535213: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2017-01-07 16:32:02
根据体系来,如果是25的话加入0.5??引物浓度是10微摩尔

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7楼2016-12-09 13:21:54
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C小杨

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-07 21:22:21
不想算。建议第二对引物设计的更长,扩增后面的循环的时候,适当提高退火温度;或者分开两次扩增
2楼2016-12-09 10:41:56
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z631535213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by C小杨 at 2016-12-09 10:41:56
不想算。建议第二对引物设计的更长,扩增后面的循环的时候,适当提高退火温度;或者分开两次扩增

第一队我设计的理论tm是46,第二对理论tm是55+

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3楼2016-12-09 12:26:06
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z631535213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by C小杨 at 2016-12-09 10:41:56
不想算。建议第二对引物设计的更长,扩增后面的循环的时候,适当提高退火温度;或者分开两次扩增

实验是一次把两对引物都加进去

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4楼2016-12-09 12:26:59
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