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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 空白对照出现引物二聚体条带，但是一起电泳的样品却没有出现二聚体条带
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

[求助] 空白对照出现引物二聚体条带，但是一起电泳的样品却没有出现二聚体条带 已有3人参与

空白要是有引物二聚体条带的话样品在同一位置也该有条带啊，问题到底出在哪？

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1楼 2016-12-05 22:06:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guishuai_tj: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-12-28 11:44:04
样品PCR把引物消耗了当然没有引物二聚体，空白对照根本没有消耗引物。
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guishuai_tj
4楼2016-12-08 11:31:15
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)
样品把引物用完了呗，这不算问题，你要非想样品也出现引物条带的话多加点引物

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guishuai_tj
6楼2016-12-08 14:37:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
5楼: Originally posted by guishuai_tj at 2016-12-08 12:36:44
那有什么方法可以消除引物二聚体呢？我的空白对照引物二聚体很亮，样品中没有出现该条带，只有目标条带。
...

你的引物用量多了吧，貌似你的PCR片段小，循环数多，消耗太多引物。一般截图的时候去掉就行。
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guishuai_tj
9楼2016-12-13 10:23:24
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普通回帖

guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-06 01:59:58
忘了说了，我做的是dna的琼脂糖凝胶电泳

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2楼2016-12-05 22:10:05
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yakun123

铁虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-06 02:00:04
我也有点好奇你的结果，也想不明白，是不是加模板后，引物与模板结合会降低引物二聚体呢，关注一下

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3楼2016-12-06 00:55:18
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
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4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-08 11:31:15
样品PCR把引物消耗了当然没有引物二聚体，空白对照根本没有消耗引物。

那有什么方法可以消除引物二聚体呢？我的空白对照引物二聚体很亮，样品中没有出现该条带，只有目标条带。

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5楼2016-12-08 12:36:44
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
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引用回帖:
6楼: Originally posted by Ailee桑卡娜 at 2016-12-08 14:37:39
样品把引物用完了呗，这不算问题，你要非想样品也出现引物条带的话多加点引物

那想消除引物二聚体呢，有什么方法吗？

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7楼2016-12-08 19:05:48
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by guishuai_tj at 2016-12-08 19:05:48
那想消除引物二聚体呢，有什么方法吗？
...

空白对照应该会有引物二聚体条带的，如果没有才是出了问题的吧…

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8楼2016-12-08 20:56:45
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
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引用回帖:
9楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-13 10:23:24
你的引物用量多了吧，貌似你的PCR片段小，循环数多，消耗太多引物。一般截图的时候去掉就行。...

是的，扩增片段小于100bp，35个循环，主要是引物二聚体条带太亮了，基本和目的条带一样亮。我打算尝试减少引物用量试试

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10楼2016-12-13 10:52:42
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