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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于启动子克隆
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于启动子克隆 已有2人参与

最近小虾在克隆一个基因启动子，想利用cDNA已知序列的的5'端设计引物去扩基因组DNA的启动子，不知道可行性有多高？另外是想请教几个问题：1）不同物种的同一基因启动子相似度高吗？2）cDNA的每段（外显子）拼接是不是都必须与启动子序列（DNA）完全已知，测序结果怎么cDNA5'端外显子衔接部分与启动子（DNA）序列有个别碱基差异呀？急盼回复！！谢谢
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没有人生来洒脱，都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
1楼 2016-11-04 09:52:24
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Anna Chen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jinnini125 at 2016-12-17 13:38:53
你好，你用的哪家试剂盒？效果如何？好做吗
...

我做的时候还挺顺利的

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9楼2016-12-17 15:12:05
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Anna Chen

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可行，我是用试剂盒做的，有差异应该也正常吧

发自小木虫IOS客户端
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2楼2016-11-04 21:23:32
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Anna Chen at 2016-11-04 21:23:32
可行，我是用试剂盒做的，有差异应该也正常吧

我用的是Takara的试剂盒，每次才步移600bp左右，据说Clontech试剂盒一次可以走3k！！
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没有人生来洒脱，都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
3楼2016-11-07 14:31:00
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韩晓兔

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-17 21:29:46
不能用cDNA做吧，万一你的5'cDNA中间间隔了内含子的话就出不来了，我用的Takara Gemone walking，一次也就400多
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4楼2016-11-08 09:26:29
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