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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物是否可以直接酶切
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wallee

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物是否可以直接酶切 已有6人参与

PCR产物是否可以不回收，直接酶切

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1楼 2016-10-21 23:44:23
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为风思雨

铁虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-23 22:20:34
你好，可以先用酒精醋酸钠回收，去除buffer盐离子后再没切，如果是dpni这样的酶可以直接在原pcr产物里直接添加

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7楼2016-10-22 09:51:16
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W生物化工

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-23 22:19:48
我们做的是先纯化，然后酶切，纯化可以去除体系中的杂质，如果不纯化可能对后续工作有不利因素
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10楼2016-10-23 11:11:13
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wallee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 净莲妖圣 at 2016-10-22 08:39:04
酶切之后再胶回收啊，酶切的小片段肯定要去掉的。

嗯，酶切之后肯定要回收的。我想知道PCR之后直接酶切，PCR成分会不会影响酶的活性

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5楼2016-10-22 08:52:02
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普通回帖

过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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可以，不过回收是为了纯化产物，所以最好回收再酶切

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不要因为别人交卷了，就乱选答案
2楼2016-10-22 00:03:48
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wallee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 过烟云烟 at 2016-10-22 00:03:48
可以，不过回收是为了纯化产物，所以最好回收再酶切

你试过吗，效率怎么样

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3楼2016-10-22 08:36:03
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净莲妖圣

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切之后再胶回收啊，酶切的小片段肯定要去掉的。

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4楼2016-10-22 08:39:04
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过烟云烟

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-25 22:15:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by wallee at 2016-10-22 08:36:03
你试过吗，效率怎么样
...

还可以，我们实验室一直都是那么做的，pcr产物回收纯化，酶切，在回收

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不要因为别人交卷了，就乱选答案
6楼2016-10-22 09:20:59
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wallee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 为风思雨 at 2016-10-22 09:51:16
你好，可以先用酒精醋酸钠回收，去除buffer盐离子后再没切，如果是dpni这样的酶可以直接在原pcr产物里直接添加

好的，下次可以试一试。不知道与胶回收对比回收率如何

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8楼2016-10-22 12:54:32
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以，我试过了，效果还不错

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9楼2016-10-23 10:11:31
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