应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物是否可以直接酶切
252/3返回列表上一页123下一页
查看: 4663  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-23 22:20:57
PCR产物直接酶切再回收：相当于获得的量大，但纯度不高。该方法可行。
PCR产物回收再酶切：纯度高，但是获得的量少。建议用此方法。
赞一下 回复此楼
11楼2016-10-23 12:27:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小布叮咚

新虫 (小有名气)
想要实验效率高的话还是回收后再酶切，这样可以保证你的条带单一没有杂带

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
happy
12楼2016-10-23 12:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-23 22:21:31
直接pcr产物最好不要直接酶切，一来可能有杂带，二来pcr体系中的离子和其他成分可能会影响酶切效率
赞一下 回复此楼
···
13楼2016-10-23 14:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小彬彬1991

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-23 22:21:50
建议用pcr纯化试剂盒纯化完了再酶切，首先酶切多大的量需要确定，不纯化一下测浓度就比较麻烦，第二，pcr产物有时候有杂带，直接酶切连接转化，可能会给后面的实验带来麻烦。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
实验做出来的是结果，做不出来就只是实验。
14楼2016-10-23 20:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

queen3511

铜虫 (小有名气)
我们经常这么干的，效果也挺好啊，省了时间了。只是你设计引物的时候要加好酶切位点和响相应的保护碱基。只是有个不好处就是，一旦后续实验转化没做好，找原因就有点麻烦。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-10-24 12:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangbowen

新虫 (小有名气)
建议回收纯化后酶切，回收用无菌水洗脱

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-10-24 13:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20081118129

新虫 (著名写手)

Drake
纯化，再酶切比较好

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-10-24 13:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

damaoouba

木虫 (正式写手)
最好回收一下。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
18楼2016-10-24 17:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blingstar

铜虫 (小有名气)
我们实验室一般是怎么稳妥怎样来，所以……

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
为科学而献身！
19楼2016-10-25 02:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wallee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by blingstar at 2016-10-25 02:25:59
我们实验室一般是怎么稳妥怎样来，所以……

我们实验室不太用纯化，PCR也跑电泳回收……

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
20楼2016-10-25 20:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wallee 的主题更新
252/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭