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载体转化单菌落不明显,菌液pcr没有目标条带
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猫不柔_
新虫
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专业: 作物种质资源与遗传育种学
[
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]
载体转化单菌落不明显,菌液pcr没有目标条带
已有3人参与
各位大神,本人分子遗传小萌新。最近在做实验胶回收后,uv下很明显2200左右的目标条带。但是连接转化后,单菌落很不明显,而且做菌液pcr只有500bp左右很亮的条带。这是怎么回事?是连接问题还是转化问题?如果做对照怎么做?
ps:连接topo载体,t载体都做过,转化dh 5alpha 感受态
@
biostar2009
@
youlinglyw
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2016-10-13 10:54:18
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Steven
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专业: 细胞衰老
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应该是连接没有连上,你延长一下连接时间试试或者换一个连接酶。
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奔跑吧,迎接每一个挑战!
2楼
2016-10-13 13:50:54
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小冀-
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专业: 生物信息学
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
没连上,小菌落有可能是培养时间长长出来的杂菌,重新连吧
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3楼
2016-10-13 16:58:10
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专业: 动物遗传学
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应该没有连接上,你可以酶切看看是不是可以切下来,或者提质粒,跑PCR试试,再或者测序验证
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生活活生生累死
4楼
2016-10-13 21:33:18
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lemonvivi
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2016-10-14 09:04:21
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