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徐云帆

新虫 (初入文坛)

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[求助] 大肠杆菌转化实验已有3人参与

各位大神帮忙大肠杆菌感受态细胞制备中 DMSO的具体作用是啥？以及大肠杆菌转化实验中不加DNA样品的负对照和加已知浓度DNA正对照的作用？

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1楼 2016-10-07 10:59:23

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wanglei512

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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1、DMSO 楼上已说的很清楚
2、通常不加质粒DNA转化的菌株在有抗性的平板上是不长的，如果长了说明感受态污染了，或者抗生素有问题这是阴性对照的作用/
3、加已知浓度DNA转化的菌株主要是看感受态的转化效率怎么样，如果长的菌落阳性菌落多，说明转化效率高，同时还可以说明你整个实验操作是正确的
个人见解：如果你做的很熟练了，这个阳性对照和阴性对照一般是不做的，这两个对照一般在自己刚做完感受态时，检测一下感受态效果怎么样，做一次就可以了，如果可以，后面转化的时候直接拿来用就行，不过以我个人的经验，阳性对照转进去的是已环化的质粒DNA，而平时我们转化的是连接产物，转化效率根本不一样，如果你的感受态可以转连接了2000bp以上片段的连接产物，那你的感受态应该效果还是不错的