应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » HPLC方法开发
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 1571  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

guozhonglong

银虫 (正式写手)

[求助] HPLC方法开发 已有4人参与

各位：
       我在做HPLC方法开发时，在4.9min处出现一个小峰，试了很多方法都除不掉，请各位多多指教！
       流动相：A是40mM的KH2PO4
                     B是乙腈
        溶剂：梯度的起始比例A：B=96：4.
       可以确定4.9min杂峰是溶剂引入的，因此溶剂尝试了不同比例的A和B，NH4H2PO4及NaH2PO4均除不掉。
请各位大师不吝赐教！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-28 17:11:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

晴川沥沥

新虫 (小有名气)
先冲一下系统，用纯水相溶或者纯乙腈溶解样品看看，多进两针，或者乙腈换一个厂家试试，或者换成屈臣氏水。

发自小木虫Android客户端
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2016-09-29 19:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, ★有帮助 2016-09-29 19:45:32
guozhonglong: 金币+8, ★有帮助 2016-09-29 20:07:41
不管怎么调整，这个小峰的面积一直没变过？你怎么判定就是溶剂引起的呢？不论它是溶剂峰还是溶剂里面的杂质峰，随着溶剂比例德邦变化，它的大小总会有变化的啊，你多给些信息，越详细越好，这样才能帮你判断，不然很难判断的。
赞一下(2人) 回复此楼
我是超级天后：天天努力，不落人后！
2楼2016-09-29 09:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by guozhonglong at 2016-09-29 20:07:31
1.你好，在不吸取溶剂，空走一针，基线很平，而走空白溶剂就有那个小峰，所以说是溶剂里面引入的；
2.在流动相为KH2PO4，当进10ul时，小峰的面积基本保持在0.0250mAU，当进20ul时，小峰的面积在0.060mAU。流动相为 ...

这样的话，溶剂峰的可能性很大。这样的话建议楼主试试微调色谱条件，比如稍微增大柱温，微调高流速，或者更换其他柱子。
赞一下(2人) 回复此楼
我是超级天后：天天努力，不落人后！
6楼2016-09-30 09:45:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidancpu

新虫 (初入文坛)
遇到过同样的问题，应该是系统脏了。把系统好好冲一下
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2016-09-30 14:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柳絮虫

新虫 (职业作家)
如果真能”确定4.9min杂峰是溶剂引入的”，那就确定溶剂纯化。但是，通常是方法有瑕疵，换换柱温，柱子等基本条件，或者换台仪器，看看是否真是溶剂问题。再说了，若这个小峰不影响你的检测，就不必太关注。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2016-09-30 16:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1045051083

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
若溶剂空白能扣除，且不影响样品检测，就可不需在意
赞一下(1人) 回复此楼
但愿一切随你愿
11楼2016-09-30 17:06:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

543799152

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.考虑换配流动相的水，如娃哈哈或其它优质瓶装水；
2.考虑换进口乙腈，如天地、默克品牌的；
3.梯度初始有机相比例不宜低于5％，除非柱子允许的；
4.磷酸盐缓冲溶液浓度适用，应有合理的pH值，不一定是纯盐，可用酸碱调整至所需pH；
5.柱子与流动相匹配，否则换柱子或流动相

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-09-30 20:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, ★有帮助 2016-09-29 19:45:42
2、换高纯度试剂
1、清洗进样系统
3、换波长
4、换亲水性（相对而言，不特指明亲水柱），或者能快速平衡额色谱柱

此4条考虑的角度各不相同
赞一下 回复此楼
不要寻找借口
3楼2016-09-29 17:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guozhonglong

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2016-09-29 09:19:26
不管怎么调整，这个小峰的面积一直没变过？你怎么判定就是溶剂引起的呢？不论它是溶剂峰还是溶剂里面的杂质峰，随着溶剂比例德邦变化，它的大小总会有变化的啊，你多给些信息，越详细越好，这样才能帮你判断，不然很 ...

1.你好，在不吸取溶剂，空走一针，基线很平，而走空白溶剂就有那个小峰，所以说是溶剂里面引入的；
2.在流动相为KH2PO4，当进10ul时，小峰的面积基本保持在0.0250mAU，当进20ul时，小峰的面积在0.060mAU。流动相为NaH2PO4,面积为基本是0.0350。流动相为 NH4H2PO4,面积为基本是0.040。
3.在流动相为KH2PO4时，溶剂：A:B=98：2,小峰面积0.0414，A:B=96：4,面积为0.0258，A:B=94:6，面积为0.0335.
4.超纯水和屈臣氏水都试过了，除不去。
请大师多多指教！
赞一下 回复此楼
5楼2016-09-29 20:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guozhonglong

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2016-09-30 09:45:24
这样的话，溶剂峰的可能性很大。这样的话建议楼主试试微调色谱条件，比如稍微增大柱温，微调高流速，或者更换其他柱子。...

非常感谢！
回复此楼
8楼2016-09-30 15:18:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guozhonglong

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lidancpu at 2016-09-30 14:20:20
遇到过同样的问题，应该是系统脏了。把系统好好冲一下

谢谢！
回复此楼
9楼2016-09-30 15:18:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guozhonglong 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +5 麻辣鱿鱼 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:51 by wxiongid
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 一志愿上海理工能源动力（085800）310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 292求调剂 +13 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 14/700 2026-03-27 15:40 by caszguilin
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315（英一）求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭