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guozhonglong

银虫 (正式写手)

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专业: 天然药物化学

[求助] HPLC方法开发已有4人参与

各位：
   我在做HPLC方法开发时，在4.9min处出现一个小峰，试了很多方法都除不掉，请各位多多指教！
   流动相：A是40mM的KH2PO4
                  B是乙腈
      溶剂：梯度的起始比例A：B=96：4.
   可以确定4.9min杂峰是溶剂引入的，因此溶剂尝试了不同比例的A和B，NH4H2PO4及NaH2PO4均除不掉。
请各位大师不吝赐教！

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1楼 2016-09-28 17:11:45

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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

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【答案】应助回帖

引用回帖:

5楼: Originally posted by guozhonglong at 2016-09-29 20:07:31
1.你好，在不吸取溶剂，空走一针，基线很平，而走空白溶剂就有那个小峰，所以说是溶剂里面引入的；
2.在流动相为KH2PO4，当进10ul时，小峰的面积基本保持在0.0250mAU，当进20ul时，小峰的面积在0.060mAU。流动相为 ...

这样的话，溶剂峰的可能性很大。这样的话建议楼主试试微调色谱条件，比如稍微增大柱温，微调高流速，或者更换其他柱子。