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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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guozhonglong

银虫 (正式写手)

[求助] HPLC方法开发 已有4人参与

各位：
       我在做HPLC方法开发时，在4.9min处出现一个小峰，试了很多方法都除不掉，请各位多多指教！
       流动相：A是40mM的KH2PO4
                     B是乙腈
        溶剂：梯度的起始比例A：B=96：4.
       可以确定4.9min杂峰是溶剂引入的，因此溶剂尝试了不同比例的A和B，NH4H2PO4及NaH2PO4均除不掉。
请各位大师不吝赐教！
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1楼 2016-09-28 17:11:45
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by guozhonglong at 2016-09-29 20:07:31
1.你好，在不吸取溶剂，空走一针，基线很平，而走空白溶剂就有那个小峰，所以说是溶剂里面引入的；
2.在流动相为KH2PO4，当进10ul时，小峰的面积基本保持在0.0250mAU，当进20ul时，小峰的面积在0.060mAU。流动相为 ...

这样的话，溶剂峰的可能性很大。这样的话建议楼主试试微调色谱条件，比如稍微增大柱温，微调高流速，或者更换其他柱子。
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
6楼2016-09-30 09:45:24
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, ★有帮助 2016-09-29 19:45:32
guozhonglong: 金币+8, ★有帮助 2016-09-29 20:07:41
不管怎么调整，这个小峰的面积一直没变过？你怎么判定就是溶剂引起的呢？不论它是溶剂峰还是溶剂里面的杂质峰，随着溶剂比例德邦变化，它的大小总会有变化的啊，你多给些信息，越详细越好，这样才能帮你判断，不然很难判断的。
赞一下(2人) 回复此楼
我是超级天后：天天努力，不落人后！
2楼2016-09-29 09:19:26
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jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, ★有帮助 2016-09-29 19:45:42
2、换高纯度试剂
1、清洗进样系统
3、换波长
4、换亲水性（相对而言，不特指明亲水柱），或者能快速平衡额色谱柱

此4条考虑的角度各不相同
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不要寻找借口
3楼2016-09-29 17:03:33
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晴川沥沥

新虫 (小有名气)
先冲一下系统，用纯水相溶或者纯乙腈溶解样品看看，多进两针，或者乙腈换一个厂家试试，或者换成屈臣氏水。

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-09-29 19:12:05
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