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guozhonglong

银虫 (正式写手)

[求助] HPLC方法开发 已有4人参与

各位:
       我在做HPLC方法开发时,在4.9min处出现一个小峰,试了很多方法都除不掉,请各位多多指教!
       流动相:A是40mM的KH2PO4
                     B是乙腈
        溶剂:梯度的起始比例A:B=96:4.
       可以确定4.9min杂峰是溶剂引入的,因此溶剂尝试了不同比例的A和B,NH4H2PO4及NaH2PO4均除不掉。
请各位大师不吝赐教!
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guozhonglong

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lidancpu at 2016-09-30 14:20:20
遇到过同样的问题,应该是系统脏了。把系统好好冲一下

谢谢!
9楼2016-09-30 15:18:22
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查看全部 13 个回答

星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, 有帮助 2016-09-29 19:45:32
guozhonglong: 金币+8, 有帮助 2016-09-29 20:07:41
不管怎么调整,这个小峰的面积一直没变过?你怎么判定就是溶剂引起的呢?不论它是溶剂峰还是溶剂里面的杂质峰,随着溶剂比例德邦变化,它的大小总会有变化的啊,你多给些信息,越详细越好,这样才能帮你判断,不然很难判断的。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
2楼2016-09-29 09:19:26
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jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guozhonglong: 金币+3, 有帮助 2016-09-29 19:45:42
2、换高纯度试剂
1、清洗进样系统
3、换波长
4、换亲水性(相对而言,不特指明亲水柱),或者能快速平衡额色谱柱

此4条考虑的角度各不相同
不要寻找借口
3楼2016-09-29 17:03:33
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晴川沥沥

新虫 (小有名气)

先冲一下系统,用纯水相溶或者纯乙腈溶解样品看看,多进两针,或者乙腈换一个厂家试试,或者换成屈臣氏水。

发自小木虫Android客户端
4楼2016-09-29 19:12:05
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