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guozhonglong

银虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 1320
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在线: 73小时
虫号: 2672737
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性别: GG
专业: 天然药物化学

[求助] HPLC方法开发已有4人参与

各位：
   我在做HPLC方法开发时，在4.9min处出现一个小峰，试了很多方法都除不掉，请各位多多指教！
   流动相：A是40mM的KH2PO4
                  B是乙腈
      溶剂：梯度的起始比例A：B=96：4.
   可以确定4.9min杂峰是溶剂引入的，因此溶剂尝试了不同比例的A和B，NH4H2PO4及NaH2PO4均除不掉。
请各位大师不吝赐教！

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1楼 2016-09-28 17:11:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

543799152

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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虫号: 3831515
注册: 2015-04-24
性别: GG
专业: 中药制剂

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

1.考虑换配流动相的水，如娃哈哈或其它优质瓶装水；
2.考虑换进口乙腈，如天地、默克品牌的；
3.梯度初始有机相比例不宜低于5％，除非柱子允许的；
4.磷酸盐缓冲溶液浓度适用，应有合理的pH值，不一定是纯盐，可用酸碱调整至所需pH；
5.柱子与流动相匹配，否则换柱子或流动相

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