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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何将已经结合的抗原抗体分开？
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hao901025

金虫 (初入文坛)

[求助] 如何将已经结合的抗原抗体分开？ 已有2人参与

最近在做免疫类的实验，零基础啊，想请教一下各位大神，如何可以将已经结合的抗原抗体分开？有人说可以用 Gly-HCl 缓冲液洗脱，可是这个缓冲液的原理是什么？都适用什么样的情况呢？可以帮忙吗？谢谢
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1楼 2016-08-29 15:15:54
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最近打算做ELISA，可是并不知道怎么把抗原抗体分开
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
2楼2016-08-29 15:34:20
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hao901025

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 曼陀罗的祈祷 at 2016-08-29 15:34:20
最近打算做ELISA，可是并不知道怎么把抗原抗体分开

好的，谢谢，那您知道那个甘氨酸-盐酸缓冲液的左右及原理吗，谢谢
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3楼2016-08-29 15:38:43
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by hao901025 at 2016-08-29 15:38:43
好的，谢谢，那您知道那个甘氨酸-盐酸缓冲液的左右及原理吗，谢谢...

并不清楚，不好意思
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
4楼2016-08-29 15:47:49
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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hao901025: 金币+2, ★有帮助 2016-08-31 08:52:53
酸性pH的甘氨酸缓冲液分离抗原抗体的一个原理应该是强酸性促进抗体抗原解离，和强碱性溶液具有一样的效果。
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5楼2016-08-30 14:52:50
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hao901025

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lubuddy at 2016-08-30 14:52:50
酸性pH的甘氨酸缓冲液分离抗原抗体的一个原理应该是强酸性促进抗体抗原解离，和强碱性溶液具有一样的效果。

除了层析，还有别的办法吗？甘氨酸缓冲液pH才2.2，会不会破坏蛋白活性？谢谢
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6楼2016-08-31 08:52:37
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Anastasiav

新虫 (小有名气)
短时间处于强酸环境应该是没问题的，洗脱液迅速用碱性缓冲溶液调pH

发自小木虫IOS客户端
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7楼2016-08-31 19:52:36
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hao901025 at 2016-08-31 08:52:37
除了层析，还有别的办法吗？甘氨酸缓冲液pH才2.2，会不会破坏蛋白活性？谢谢...

解离后迅速回复中性环境，好像记得是用弱碱性溶液中和。你可以看一下Thermo的抗体纯化试剂盒的说明书，里面有介绍的。
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8楼2016-08-31 23:03:10
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hao901025: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-09-02 09:35:55
https://tools.thermofisher.com/c ... ibody_Purifi_UG.pdf
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9楼2016-08-31 23:08:15
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