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[交流] PCR中的相关问题

今天PCR后跑电泳，第一个孔marker条带不清晰，而且marker也是新的。最后两个孔的阴性对照居然有条带，怎么回事呀？酶和水是新换的。请各位大神指点。谢谢！

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1楼 2016-08-11 16:30:33

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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-16 07:59:25

这种情况我也经常遇到。这就是假阳性。有时候这很难消除的。提高退火温度、减少循环次数都是降低假阳性的途径。另外，你可以试着P一次内参看看，看看内参是否均一。而且从你的图看来其他的条带还是比阴性亮的啊

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谋事在人，成事在天

2楼2016-08-12 08:51:50

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引用回帖:

2楼: Originally posted by RNA世界 at 2016-08-12 08:51:50
这种情况我也经常遇到。这就是假阳性。有时候这很难消除的。提高退火温度、减少循环次数都是降低假阳性的途径。另外，你可以试着P一次内参看看，看看内参是否均一。而且从你的图看来其他的条带还是比阴性亮的啊

这个是今天刚刚跑到电泳，还是那样，不过条带比上次亮了。而且marker是不是降解了呀

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3楼2016-08-12 16:27:46

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