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qq376514009

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑胶总是跑不出来啊 已有2人参与

问一下胶一定要均匀吗? 今天这次跑的胶,点样部分厚,下面薄,连marker都没跑出来。还有其他可能原因吗?
我用的是琼脂糖,EB染色,点样是从一种蜱虫中提取的DNA,点样5-6微升。。我们就第一次跑出来了18sDNA(还有16s ITs 没有看到)。后来什么都没跑出来过0.0.还有一次是弥散,marker每次都不明显,dna也不明显,是染色不够充分吗?染20多分钟呢0.0  我是本科生。 第一次做这个。求大神帮忙分析一下大概原因啊。
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主问题不少呀,还是好好看下跑电泳的文献,视频吧,或请个师哥教教你。
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2016-07-21 11:04:31
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卡其佐

新虫 (初入文坛)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-20 07:40:08
很多原因可能呢 比如可能pcr没跑好 可能eb失效了 可能引物问题 可能缓冲液问题 一个一个排查吧

发自小木虫Android客户端
2楼2016-07-19 22:29:50
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还没想好名

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-20 07:40:27
Maker都没跑出来,考虑琼脂糖浓度和加入TAE/TBE浓度、EB浓度、点泳缓冲液浓度、电泳槽正负极是否接反

发自小木虫Android客户端
散场电影
3楼2016-07-19 22:48:07
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履霜

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做胶好好做哦,这是什么玩意啊?
重新做胶,胶必须纯,对比自己的片段长度,调整胶的浓度。
胶要好好凝固,不要不舍得用胶。
电泳槽的buffer用新的,
marker都没跑出来,是不是点飘了?电极接反了?
I measured love by the extent of my jealousy...
4楼2016-07-20 23:51:02
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