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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 跑胶总是跑不出来啊
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qq376514009

新虫 (初入文坛)

[求助] 跑胶总是跑不出来啊 已有2人参与

问一下胶一定要均匀吗？ 今天这次跑的胶，点样部分厚，下面薄，连marker都没跑出来。还有其他可能原因吗？
我用的是琼脂糖，EB染色，点样是从一种蜱虫中提取的DNA，点样5-6微升。。我们就第一次跑出来了18sDNA（还有16s ITs 没有看到）。后来什么都没跑出来过0.0.还有一次是弥散，marker每次都不明显，dna也不明显，是染色不够充分吗？染20多分钟呢0.0  我是本科生。 第一次做这个。求大神帮忙分析一下大概原因啊。
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1楼 2016-07-19 21:44:56
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还没想好名

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-20 07:40:27
Maker都没跑出来，考虑琼脂糖浓度和加入TAE/TBE浓度、EB浓度、点泳缓冲液浓度、电泳槽正负极是否接反

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散场电影
3楼2016-07-19 22:48:07
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卡其佐

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-20 07:40:08
很多原因可能呢 比如可能pcr没跑好 可能eb失效了 可能引物问题 可能缓冲液问题 一个一个排查吧

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2楼2016-07-19 22:29:50
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履霜

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做胶好好做哦，这是什么玩意啊？
重新做胶，胶必须纯，对比自己的片段长度，调整胶的浓度。
胶要好好凝固，不要不舍得用胶。
电泳槽的buffer用新的，
marker都没跑出来，是不是点飘了？电极接反了？
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I measured love by the extent of my jealousy...
4楼2016-07-20 23:51:02
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主问题不少呀，还是好好看下跑电泳的文献，视频吧，或请个师哥教教你。
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采菊东篱下，悠然见南山。
5楼2016-07-21 11:04:31
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