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bxzc12345

新虫 (小有名气)

[求助] 发酵液分离纯化 已有4人参与

紫外检查不到,求有什么好的分离方法?最好具体

发自小木虫IOS客户端
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iayala

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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从发酵液中分离目标蛋白,通常使用的是亲和层析的方法,使用的是小亲和层析柱子。通常根据你目标蛋白的特性,选择对应的亲和柱,比如,蛋白带His-tag标签,就选镍柱;蛋白带Fc片段,就选Protein A柱。依此类推,就是说,首先要搞清蛋白的结构或者所带标签,再做分离。
另,你说的紫外检查不到,是什么意思,通常培养基由于含有蛋白,会产生很多吸收峰的,发酵液不会检测不到紫外吸收;如果你说的是纯化后,紫外吸收检测不到,就要看你的发酵液SDS-PAGE中有无表达出目标蛋白;如果有,但纯化后就没有了,则说明纯化方法不对。改进的前提是给出更多的蛋白及你纯化方法的信息,才能帮你支招。
祝您好运!
7楼2016-07-20 17:27:40
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a2703521

金虫 (小有名气)

123

分离的方法很多,不过你这个帖子太简单了,什么问题都没体现出来,怎么帮助?
2楼2016-07-19 08:16:22
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
发酵液分离?分离什么呀,菌体吗?而且什么东西紫外检测不到~
···
3楼2016-07-19 10:15:56
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zhutao41

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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bxzc12345: 金币+10 2016-07-20 07:14:24
换检测器咯,示差检测器,质谱检测器
发酵液很少有没紫外吸收的东西吧,你是怎么处理样品的
没紫外吸收的不太好分啊
4楼2016-07-19 22:08:33
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