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bxzc12345新虫 (小有名气)
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发酵液分离纯化 已有4人参与
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紫外检查不到,求有什么好的分离方法?最好具体 发自小木虫IOS客户端 |
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a2703521
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2楼2016-07-19 08:16:22
小冀-
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3楼2016-07-19 10:15:56
zhutao41
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4楼2016-07-19 22:08:33
5楼2016-07-20 10:08:34
6楼2016-07-20 15:54:41
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
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从发酵液中分离目标蛋白,通常使用的是亲和层析的方法,使用的是小亲和层析柱子。通常根据你目标蛋白的特性,选择对应的亲和柱,比如,蛋白带His-tag标签,就选镍柱;蛋白带Fc片段,就选Protein A柱。依此类推,就是说,首先要搞清蛋白的结构或者所带标签,再做分离。 另,你说的紫外检查不到,是什么意思,通常培养基由于含有蛋白,会产生很多吸收峰的,发酵液不会检测不到紫外吸收;如果你说的是纯化后,紫外吸收检测不到,就要看你的发酵液SDS-PAGE中有无表达出目标蛋白;如果有,但纯化后就没有了,则说明纯化方法不对。改进的前提是给出更多的蛋白及你纯化方法的信息,才能帮你支招。 祝您好运! |
7楼2016-07-20 17:27:40
bio_weiyaya
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8楼2016-07-21 09:11:54
bxzc12345
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