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bxzc12345新虫 (小有名气)
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发酵液分离纯化 已有4人参与
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紫外检查不到，求有什么好的分离方法？最好具体 发自小木虫IOS客户端 |
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a2703521
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2楼2016-07-19 08:16:22
小冀-
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3楼2016-07-19 10:15:56
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4楼2016-07-19 22:08:33
5楼2016-07-20 10:08:34
6楼2016-07-20 15:54:41
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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从发酵液中分离目标蛋白，通常使用的是亲和层析的方法，使用的是小亲和层析柱子。通常根据你目标蛋白的特性，选择对应的亲和柱，比如，蛋白带His-tag标签，就选镍柱；蛋白带Fc片段，就选Protein A柱。依此类推，就是说，首先要搞清蛋白的结构或者所带标签，再做分离。 另，你说的紫外检查不到，是什么意思，通常培养基由于含有蛋白，会产生很多吸收峰的，发酵液不会检测不到紫外吸收；如果你说的是纯化后，紫外吸收检测不到，就要看你的发酵液SDS-PAGE中有无表达出目标蛋白；如果有，但纯化后就没有了，则说明纯化方法不对。改进的前提是给出更多的蛋白及你纯化方法的信息，才能帮你支招。 祝您好运! |
7楼2016-07-20 17:27:40
bio_weiyaya
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8楼2016-07-21 09:11:54
bxzc12345
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