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BL21大肠杆菌质粒提取 已有4人参与
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师兄将pMAL转入了BL21类大肠杆菌中，我用氨苄抗性的培养基摇菌12小时后提质粒，浓度只能提到几十ng,请问表达蛋白的菌株是不是不适合做质粒提取？ @biostar2009 发自小木虫Android客户端 |
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5楼2016-07-15 09:54:20
Bioexperixgs
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【答案】应助回帖
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12小时能提到几十ng已经很不错了。1.培养16-18小时；2.溶液3后，离心上清放在柱子里室温孵育时间延长；3.酒精洗的时候不洗第二次；4.洗脱时，EB孵育时间延长，可将EB加热至70度后使用。 发自小木虫Android客户端 |
12楼2016-07-18 23:02:39
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xn8008: 应助指数+1 2016-07-16 09:27:28
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xn8008: 应助指数+1 2016-07-16 09:27:28
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可以做3管或4管，每两三毫升过夜菌液一管，离心所得上清液分批次加到一个吸附柱中，这样浓度应该会多的吧。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-07-14 18:03:31
3楼2016-07-14 19:11:47
4楼2016-07-15 09:36:08
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6楼2016-07-15 21:47:08
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7楼2016-07-17 14:35:18
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8楼2016-07-18 12:11:05
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10楼2016-07-18 17:07:30
20