24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3612  |  回复: 16

绿松石6727

新虫 (小有名气)

[求助] BL21大肠杆菌质粒提取 已有4人参与

师兄将pMAL转入了BL21类大肠杆菌中,我用氨苄抗性的培养基摇菌12小时后提质粒,浓度只能提到几十ng,请问表达蛋白的菌株是不是不适合做质粒提取?

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该和载体也有关系,不同质粒的拷贝数不一样,富集菌液提取也是一种方法
5楼2016-07-15 09:54:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

12小时能提到几十ng已经很不错了。1.培养16-18小时;2.溶液3后,离心上清放在柱子里室温孵育时间延长;3.酒精洗的时候不洗第二次;4.洗脱时,EB孵育时间延长,可将EB加热至70度后使用。

发自小木虫Android客户端
12楼2016-07-18 23:02:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

Huobol

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-15 07:26:33
xn8008: 应助指数+1 2016-07-16 09:27:28
可以做3管或4管,每两三毫升过夜菌液一管,离心所得上清液分批次加到一个吸附柱中,这样浓度应该会多的吧。

发自小木虫Android客户端
让羽毛再飞一会儿
2楼2016-07-14 18:03:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绿松石6727

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Huobol at 2016-07-14 18:03:31
可以做3管或4管,每两三毫升过夜菌液一管,离心所得上清液分批次加到一个吸附柱中,这样浓度应该会多的吧。

嗯,应该可以~

发自小木虫Android客户端
3楼2016-07-14 19:11:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不爱做实验

银虫 (正式写手)

多摇一点菌液,多富集几次吧
4楼2016-07-15 09:36:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-07-16 09:27:39
表达菌株拷贝量低,而且有背景质粒,既bl21自身的质粒,非常不建议用表达菌提质粒

发自小木虫Android客户端
6楼2016-07-15 21:47:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不会的吧,我们也用BL21做感受态进行转化过,质粒浓度提出来和DH5a差不了太多~
···
7楼2016-07-17 14:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bright8

铁杆木虫 (著名写手)

摇时间长一点了,菌量多加一点,现在试剂盒提取来的量应该还好吧!

发自小木虫Android客户端
8楼2016-07-18 12:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Super小新

新虫 (小有名气)

9楼2016-07-18 13:39:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花花贝

金虫 (知名作家)

10楼2016-07-18 17:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 绿松石6727 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 7/350 2026-05-23 23:01 by L135790
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 7/350 2026-05-23 16:57 by articlefan
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +3 zju2000 2026-05-21 4/200 2026-05-23 08:33 by xli1984
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +27 国自然国社科中 2026-05-17 28/1400 2026-05-22 16:25 by hunter无悔
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见