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目的蛋白能同时存在于上清和包涵体中吗?
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目的蛋白能同时存在于上清和包涵体中吗?
已有6人参与
如题,上清和包涵体分离后跑电泳,结果包涵体蛋白浓度太低,只能看见一两个很暗淡的条带,无法与上清形成对比。但是上清中确实出现了目的条带,所以我想问下目的蛋白能同时存在于上清和包涵体中吗?
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1楼
2016-07-06 09:15:46
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7楼
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Originally posted by
ls2046
at 2016-07-06 12:27:58
这要看你使用的是什么载体了,带有信号肽的分泌型载体,内外都有是正常的,如果没有信号肽纯胞内表达载体话,出现在胞外的可能不大(或者说不常见),除非时间太长菌体自溶(这个跟蛋白质性质也有关)。可以看看载体 ...
pET32a带不带信号肽?
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10楼
2016-07-06 18:05:43
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2016-07-07 08:26:58
包涵体就是因为表达太快,来不及折叠形成的,有可能同时存在于上清和包涵体中的,我的蛋白就是上清和沉淀里面都有,但是上清里面量少,如果你想要可溶的蛋白的话,可以把温度降下来,17度20h
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想做个有趣的人,却在逗比的道路上越走越远~
3楼
2016-07-06 10:10:05
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3楼
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Originally posted by
曼陀罗的祈祷
at 2016-07-06 10:10:05
包涵体就是因为表达太快,来不及折叠形成的,有可能同时存在于上清和包涵体中的,我的蛋白就是上清和沉淀里面都有,但是上清里面量少,如果你想要可溶的蛋白的话,可以把温度降下来,17度20h
问题是包涵体蛋白浓度太低,电泳跑出来空白一片,细看才能看到2个杂蛋白条带,无法比较上清和包涵体中目的蛋白哪个更多......
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2016-07-06 10:14:31
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可以的,我的蛋白就同时在上清和包涵体中
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5楼
2016-07-06 10:44:33
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