应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR引物设计原则
51/1返回列表
查看: 6227  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sherry_wang

木虫 (正式写手)

[交流] 荧光定量PCR引物设计原则

荧光定量PCR的引物设计原则是什么呢？原来做半定量PCR，按照普通引物设计原则进行设计，但是今天看下面这篇文献，发现文献中给出同一基因的荧光定量PCR和半定量PCR的引物不同，已知道半定量PCR引物不能用于荧光定量PCR，不知道按说明书上的荧光定量PCR引物设计能不能直接用来做半定量PCR？
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YCZZ201603007.htm
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

虫友问答-分子生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-26 16:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by sherry_wang at 2016-04-27 22:31:04
我们以前做半定量的时候是直接用普通PCR仪扩增的产物去跑电泳，我看有杂志要求荧光定量数据和电泳图都要有，是用荧光定量的产物去跑的电泳吗？
另，引物二聚体那个解释清楚了，但是设计引物的时候，也会有软件评价 ...

你可以用荧光定量的产物跑电泳，关于二聚体，只是说有可能，软件评价不是万能的。
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-27 23:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sherry_wang: 金币+4 2016-05-14 15:58:08
两种定量方法使用的引物是不一样，不能通用。荧光定量引物除满足常规引物的条件，对PCR产物大小有限制，一般产物大小在90-250bp范围，这个产物如果用来做半定量，条带会和引物二聚体有重合，影响实际定量效果；而半定量一般产物在300-600bp之间。
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2016-04-26 21:13:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
sherry_wang: 金币+1 2016-05-14 15:58:22
DNAMAN里可以直接设计

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-26 23:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-04-26 21:13:20
两种定量方法使用的引物是不一样，不能通用。荧光定量引物除满足常规引物的条件，对PCR产物大小有限制，一般产物大小在90-250bp范围，这个产物如果用来做半定量，条带会和引物二聚体有重合，影响实际定量效果；而半 ...

谢谢 产物用来做半定量的意思是荧光定量的产物去跑条带吗？荧光定量引物二聚体是什么意思？
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-27 10:29:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-14 15:58 by KXypaGgBBlw7
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-14 13:35 by KXypaGgBBlw7
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1Nb0IVlmV6v0 2026-11-11 4/200 2026-11-13 11:18 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:48 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:25 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:43 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:25 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭