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鸿鹄00000

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌BL21发酵液离心问题 已有3人参与

在LB培养基中培养的大肠杆菌BL21(DE3)的发酵液的获取:在4摄氏度,8000转/分钟,离心5分钟的情况下,对菌体会有影响吗?比如说菌体破裂;或者产生其他的影响以至于最终导致离心后的上清液含其他杂质成分?如果这种条件下离心对上清有影响,那离心要在多少度下合适呢?
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好好学习,天天向上
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zywys2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

离心机的剪切力比较小,一般不会造成菌体大量裂解。4℃足矣,没必要太低。
要菌体完全不发生变化几乎是不可能的。
陶瓷膜过滤、中空纤维过滤剪切力都要大很多,从担心菌体裂解的角度还是离心机比较靠谱。
3楼2016-05-09 16:43:56
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查看全部 4 个回答

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
4度条件下,8000转离心5min对菌体没有影响的,可以放心,如果担心上清有杂质,将时间调到10min也可以
···
2楼2016-04-25 14:35:30
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Cathering_w

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们一般是4℃,4000或3000rpm,大体积30分钟,小体积15分钟

发自小木虫Android客户端
博士终于毕业了,未来还有什么困难能难得倒我呢!加油我得未来。
4楼2016-05-09 20:05:54
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