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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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suxinanxiang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】选择哪种大肠杆菌比较好? 已有2人参与

大家好,我的实验如今遇到了这样一个问题,原来实验采用E.coli BL21(DE3), 载体为pet-20b(+),由于在发酵上罐的过程中出现了噬菌体问题,而且迟迟未能解决,因此想通过采用其他载体和宿主菌的方法来解决此问题,要求是载体不要采用T7启动子,宿主菌不要为DE3的溶源菌,但表达量最好能高些,想请教各位前辈给个关于载体和宿主的建议,谢谢大家!!谢谢!
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

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dhd997(金币+3): 感谢交流 2011-02-18 10:51:23
invitrogen pTrcHis2 vector,trp-lac双启动子,不需要用DE3溶原菌就可以表达,比如常见宿主JM109
Thank-you,so-blue.
2楼2011-02-18 08:53:55
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suxinanxiang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-02-18 08:53:55:
invitrogen pTrcHis2 vector,trp-lac双启动子,不需要用DE3溶原菌就可以表达,比如常见宿主JM109

请问您用的多吗?表达量高吗?用jm109的话,对蛋白的分泌和降解影响大不大!谢谢!
3楼2011-02-18 11:39:13
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susizheng

木虫 (著名写手)

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lstt09nk(金币+3): 鼓励交流,欢迎常来 2011-02-18 20:10:27
引用回帖:
Originally posted by suxinanxiang at 2011-02-18 11:39:13:

请问您用的多吗?表达量高吗?用jm109的话,对蛋白的分泌和降解影响大不大!谢谢!

trp-lac是个很强的启动子,表达量应该很理想。
大肠的都是胞内表达,应该不会分泌吧。
Thank-you,so-blue.
4楼2011-02-18 14:42:09
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