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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】选择哪种大肠杆菌比较好？
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suxinanxiang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】选择哪种大肠杆菌比较好？ 已有2人参与

大家好，我的实验如今遇到了这样一个问题，原来实验采用E.coli BL21(DE3)， 载体为pet-20b(+)，由于在发酵上罐的过程中出现了噬菌体问题，而且迟迟未能解决，因此想通过采用其他载体和宿主菌的方法来解决此问题，要求是载体不要采用T7启动子，宿主菌不要为DE3的溶源菌，但表达量最好能高些，想请教各位前辈给个关于载体和宿主的建议，谢谢大家！！谢谢！
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1楼 2011-02-17 22:13:32
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3): 感谢交流 2011-02-18 10:51:23
invitrogen pTrcHis2 vector，trp-lac双启动子，不需要用DE3溶原菌就可以表达，比如常见宿主JM109
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2011-02-18 08:53:55
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suxinanxiang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-02-18 08:53:55:
invitrogen pTrcHis2 vector，trp-lac双启动子，不需要用DE3溶原菌就可以表达，比如常见宿主JM109

请问您用的多吗？表达量高吗？用jm109的话，对蛋白的分泌和降解影响大不大！谢谢！
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3楼2011-02-18 11:39:13
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流，欢迎常来 2011-02-18 20:10:27
引用回帖:
Originally posted by suxinanxiang at 2011-02-18 11:39:13:

请问您用的多吗？表达量高吗？用jm109的话，对蛋白的分泌和降解影响大不大！谢谢！

trp-lac是个很强的启动子，表达量应该很理想。
大肠的都是胞内表达，应该不会分泌吧。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
4楼2011-02-18 14:42:09
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