24小时热门版块排行榜    

查看: 2221  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jiangpozi

新虫 (小有名气)

[求助] 多点突变求助已有3人参与

各位大侠好,我已经用质粒扩增,DPNI消化,然后转化获得了单点突变质粒,现在想要在突变3个位点,还用这种方法做,那怎么做呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangpozi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 江苏虞游 at 2016-04-18 13:35:01
那我建议你把片段切下来,纯化出来当作模板,突变之后再连进去就可以了
...

我现在是以一个突变体质粒为模板,再P另一个突变体,但是测序发现本来以突变体为模板的那个突变点又变回原来的了,得到的只有一个点的突变,这好郁闷啊!
17楼2016-04-20 14:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

jiangpozi

新虫 (小有名气)

有没有人指导下呢
2楼2016-04-05 15:04:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


同时突变3个,那就三对引物放进去同时做呗

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-05 20:50:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangpozi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biosci at 2016-04-05 20:50:29
同时突变3个,那就三对引物放进去同时做呗

请问可以这么做吗?引物之间退火温度不一样,还有它们会连起来吗?
4楼2016-04-05 22:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见