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jiangpozi

新虫 (小有名气)

[求助] 多点突变求助 已有3人参与

各位大侠好,我已经用质粒扩增,DPNI消化,然后转化获得了单点突变质粒,现在想要在突变3个位点,还用这种方法做,那怎么做呢?
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江苏虞游

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by jiangpozi at 2016-04-15 15:21:28
主要是我现在设计的是DPNI消化的方法,而且片段都在质粒上了...

那方法一样的,质粒不大的话就可以直接设计引物做overlap,再用酶消化即可。如果质粒太大,建议把你的片段从质粒上切下来做完突变再连进去,我个人推荐后者

发自小木虫IOS客户端
14楼2016-04-15 22:35:48
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jiangpozi

新虫 (小有名气)

有没有人指导下呢
2楼2016-04-05 15:04:41
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


同时突变3个,那就三对引物放进去同时做呗

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-05 20:50:29
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jiangpozi

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biosci at 2016-04-05 20:50:29
同时突变3个,那就三对引物放进去同时做呗

请问可以这么做吗?引物之间退火温度不一样,还有它们会连起来吗?
4楼2016-04-05 22:55:35
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