24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1026  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

[求助] 目的基因遗传转化

我的目的片段大约1800bp,用的是PMD19载体(大概250bp),连接之后,做转化到大肠杆菌感受态里,挑菌检测结果如图,maker2000,由图可知转进去的大概只有1000bp,大部分都是这样,如果转成功了,应该是在2000bp条带以上的才对的,但是就算没转成功,但出现1000bp的这么多菌落又是怎么回事?做了很多次都是跑菌检测还是那样的结果,也拿过去测序,结果是空载,现在卡在这里了,请各位大神指点,感激不尽!

目的基因遗传转化


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ENDEAVORCD at 2016-04-01 23:00:19
检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

原来这也存在问题呀,我用的是这个载体的通用引物,也不知道是否有接头什么的,还是一个初学者,很多都不太会,我得问问我们课题组负责合成这引物是否有接头才行,感谢!

发自小木虫Android客户端
5楼2016-04-02 18:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

maixiaodaou

新虫 (小有名气)

那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

发自小木虫Android客户端
2楼2016-04-01 22:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ENDEAVORCD

铜虫 (初入文坛)

检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-01 23:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-04-01 22:52:37
那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

我问过师兄师姐,他们说那个载体是只有那么多吧,我也没去特地查一下,难道这也有问题

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-02 18:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:25 by macy2011
[考研] 070300化学求调剂 +10 起个名咋这么难 2026-03-27 11/550 2026-04-03 10:24 by macy2011
[考研] 材料科学与工程考研 +7 拯救皮特托先生 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:37 by zllcz
[考研] 271分求调剂学校 +9 zph158488! 2026-04-02 9/450 2026-04-03 08:57 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +7 愿旅途永远坦然 2026-04-02 7/350 2026-04-03 08:22 by fangshan711
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +11 大馋小子 2026-03-28 11/550 2026-04-02 15:59 by yunlongyang
[考研] 求调剂推荐 +3 南山南@ 2026-04-01 3/150 2026-04-02 12:09 by xiaoranmu
[考研] 327求调剂 +9 汲亦昊 2026-03-29 9/450 2026-04-02 11:44 by 运气yunqi
[考研] 372求调剂 +3 jj涌77 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:57 by olim
[考研] 301求调剂 +13 A_JiXing 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:01 by sanrepian
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +12 hanamiko 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:34 by 运气yunqi
[考研] 085600,321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-31 13/650 2026-04-01 12:35 by chemdavid
[考研] 070300求调剂306分 +5 26要上岸 2026-03-27 5/250 2026-04-01 11:09 by oooqiao
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 求调剂 +8 11ggg 2026-03-30 8/400 2026-03-31 13:56 by nanaliuyun
[考研] 11408总分309,一志愿东南大学求调剂,不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 312,生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
信息提示
请填处理意见