24小时热门版块排行榜    

查看: 1128  |  回复: 5

xiaojiang

新虫 (小有名气)

[求助] 目的基因遗传转化

我的目的片段大约1800bp,用的是PMD19载体(大概250bp),连接之后,做转化到大肠杆菌感受态里,挑菌检测结果如图,maker2000,由图可知转进去的大概只有1000bp,大部分都是这样,如果转成功了,应该是在2000bp条带以上的才对的,但是就算没转成功,但出现1000bp的这么多菌落又是怎么回事?做了很多次都是跑菌检测还是那样的结果,也拿过去测序,结果是空载,现在卡在这里了,请各位大神指点,感激不尽!

目的基因遗传转化


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maixiaodaou

新虫 (小有名气)

那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

发自小木虫Android客户端
2楼2016-04-01 22:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ENDEAVORCD

铜虫 (初入文坛)

检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-01 23:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-04-01 22:52:37
那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

我问过师兄师姐,他们说那个载体是只有那么多吧,我也没去特地查一下,难道这也有问题

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-02 18:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ENDEAVORCD at 2016-04-01 23:00:19
检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

原来这也存在问题呀,我用的是这个载体的通用引物,也不知道是否有接头什么的,还是一个初学者,很多都不太会,我得问问我们课题组负责合成这引物是否有接头才行,感谢!

发自小木虫Android客户端
5楼2016-04-02 18:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-04-01 22:52:37
那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

那是多大片段呀?

发自小木虫Android客户端
6楼2016-04-02 18:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaojiang 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +3 Tide man 2026-08-10 3/150 2026-08-10 21:48 by GZUZM
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +3 瞬息宇宙 2026-08-10 3/150 2026-08-10 18:27 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
请填处理意见