24小时热门版块排行榜    

查看: 1118  |  回复: 5

xiaojiang

新虫 (小有名气)

[求助] 目的基因遗传转化

我的目的片段大约1800bp,用的是PMD19载体(大概250bp),连接之后,做转化到大肠杆菌感受态里,挑菌检测结果如图,maker2000,由图可知转进去的大概只有1000bp,大部分都是这样,如果转成功了,应该是在2000bp条带以上的才对的,但是就算没转成功,但出现1000bp的这么多菌落又是怎么回事?做了很多次都是跑菌检测还是那样的结果,也拿过去测序,结果是空载,现在卡在这里了,请各位大神指点,感激不尽!

目的基因遗传转化


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maixiaodaou

新虫 (小有名气)

那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

发自小木虫Android客户端
2楼2016-04-01 22:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ENDEAVORCD

铜虫 (初入文坛)

检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-01 23:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-04-01 22:52:37
那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

我问过师兄师姐,他们说那个载体是只有那么多吧,我也没去特地查一下,难道这也有问题

发自小木虫Android客户端
4楼2016-04-02 18:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ENDEAVORCD at 2016-04-01 23:00:19
检测的引物确认一下,是否带有接头,带接头可能没有重组上也能扩出条带的哦……

原来这也存在问题呀,我用的是这个载体的通用引物,也不知道是否有接头什么的,还是一个初学者,很多都不太会,我得问问我们课题组负责合成这引物是否有接头才行,感谢!

发自小木虫Android客户端
5楼2016-04-02 18:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojiang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-04-01 22:52:37
那个载体怎么可能250bp,可能连接转化就出了问题,导致没有阳性的单菌落

那是多大片段呀?

发自小木虫Android客户端
6楼2016-04-02 18:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaojiang 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 CyTWnZiM0cS6 2026-08-02 5/250 2026-08-02 20:43 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 5/250 2026-08-02 20:32 by 3VGOm6paSgqv
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 5/250 2026-08-02 20:31 by 3VGOm6paSgqv
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 7/350 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 20:24 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 12/600 2026-08-02 20:21 by drbart
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 6/300 2026-08-02 20:14 by 3VGOm6paSgqv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 14/700 2026-08-02 20:11 by 3VGOm6paSgqv
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 10/500 2026-08-02 20:03 by 3VGOm6paSgqv
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 17/850 2026-08-02 19:58 by 3VGOm6paSgqv
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 21/1050 2026-08-02 19:52 by 3VGOm6paSgqv
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:44 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:24 by ca3DVAx4OB19
[基金申请] 准备明年的基金了 +7 Tide man 2026-07-27 7/350 2026-08-02 16:43 by gltch
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 10/500 2026-08-02 10:00 by 锦衣卫寒战
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 7/350 2026-08-02 07:59 by 88817753
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 同事接到电话了,我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
信息提示
请填处理意见