| 查看: 2333 | 回复: 17 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
圆加leaf新虫 (小有名气)
|
[交流]
想让大肠杆菌表达它原来没有的蛋白，是不是必需先构建克隆载体再构建表达载体？
|
||
|
本人想转一个新的基因进大肠杆菌，让他表达原来没有的一种蛋白，研究它的代谢量。 方式是靠构建质粒，可是又看到有基因克隆载体，和表达载体，有点懵了，我是不是需要先用一个克隆载体，转化进感受态细胞，让他复制，然后再提这个基因，再用这基因构建一个表达载体，再转进细胞，然后才可以稳定表达，研究代谢？！ 请各位前辈指导！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有222人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
额不是大神，只是略懂皮毛。 pET表达你的目的蛋白特异性很强的，表达量大速度快，所以会形成包涵体，导致没活性。 感受态细胞可以用于构建你的载体，不用于表达。表达宿主菌商业化的有BL21，ROSETTA等。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-04-01 15:41:22
2楼2016-03-30 10:21:03
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+4, 非常感谢！ 2016-03-30 13:41:53
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+4, 非常感谢！ 2016-03-30 13:41:53
| 姑娘不需要，直接构建表达载体就行，参考大肠杆菌蛋白表达操作流程步骤原理：http://www.detaibio.com/topics/dachangganjunbiaodaliucheng-sop.html |
3楼2016-03-30 10:27:50
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+4 2016-03-30 13:42:18
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+4 2016-03-30 13:42:18
|
其实克隆载体的概念太大也模糊，本身表达载体就是一个普通的克隆载体呀，只不过它本身经过改造了，相对其他克隆载体，在蛋白表达方面更有优势，但基本的克隆载体功能它也具有。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-03-30 12:24:49
投票:
10