应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » EDC/NHS偶连实验，如何在两种缓冲溶液中转换？谢谢！
281/3返回列表123下一页
查看: 2878  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

weiwei619

金虫 (小有名气)

[求助] EDC/NHS偶连实验，如何在两种缓冲溶液中转换？谢谢！ 已有3人参与

我在做EDC/NHS偶连实验，但是看文献中缓冲溶液是先在MES（ph=4-6）中活化，然后在PBS里偶联。我不明白我的材料如何在两种缓冲溶液中转换？求大神指导！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2016-03-25 21:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

iceberg132

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

If your material is solid(like film or fibers), you just take out it from MES buffer and then put it into PBS buffer.
If your material is water soluble(like protein) , you have to adding NaOH to the previous solution and change pH to 7.5-8.
赞一下(7人) 回复此楼
21楼2016-04-12 21:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
我觉得是应该用酸性的缓冲液活化，以后再偶联，活化的时候先不要加氨基啊

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2016-03-25 23:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-26 09:56:47
小分子在MES中，而BSA在PBS中，这两者混一起那不是既有MES又有PBS，而且可能整体PH值也变了吧，感觉好乱...

小分子是带氨基的吗

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-03-26 09:58:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
偶联什么

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2016-03-25 22:43:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
活化什么

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
3楼2016-03-25 22:43:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiwei619

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luolilan at 2016-03-25 22:43:36
偶联什么

活化BSA蛋白质上的羧基，与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化，再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的？
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-25 23:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基，与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化，再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的？...

蛋白质应该是有氨基的，羧基在活化的时候如果有氨基就跟它反应了，PBS缓冲液只是为了保护蛋白，

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-25 23:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基，与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化，再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的？...

应该是先活化羧基，活化的时候不要加氨基，活化一定时间后，再将带氨基的物质和ph等于7.4的pbs缓冲液一起加进去，这样氨基就会和羧基反应了，而且我怎么感觉有问题啊，你确定是活化BSA上的羧基吗？如果我没记错的话，BSA是有氨基的，你是不是讲BSA和小分子弄反了。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-25 23:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基，与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化，再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的？...

PBS的作用就是为了保护蛋白的啊，不然可以直接用水不是吗？所以，我猜应该是活化小分子染料上的羧基，之后再将BSA溶解在PH等于7.4的PBS中，利用蛋白上的氨基与活化后的羧基反应，反正我做的实验是这样的步骤，不知道为何你的是反的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-03-25 23:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
所以，你再好好研究研究

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-03-25 23:50:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luolilan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基，与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化，再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的？...

建议使用PH等于5的缓冲液进行活化

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-03-26 00:01:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weiwei619 的主题更新
281/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学280分求调剂 +8 722865 2026-03-23 8/400 2026-03-26 20:00 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 0703化学338求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:07 by macy2011
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +9 holy J 2026-03-21 9/450 2026-03-26 15:47 by 161765490
[考研] 材料与化工考研调剂 +10 孅華 2026-03-22 10/500 2026-03-26 15:40 by zzll406
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +6 哈哈157349 2026-03-21 6/300 2026-03-26 10:39 by 醉在风里
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭