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weiwei619

金虫 (小有名气)

[求助] EDC/NHS偶连实验,如何在两种缓冲溶液中转换?谢谢! 已有3人参与

我在做EDC/NHS偶连实验,但是看文献中缓冲溶液是先在MES(ph=4-6)中活化,然后在PBS里偶联。我不明白我的材料如何在两种缓冲溶液中转换?求大神指导!谢谢!
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luolilan

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基,与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化,再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的?...

应该是先活化羧基,活化的时候不要加氨基,活化一定时间后,再将带氨基的物质和ph等于7.4的pbs缓冲液一起加进去,这样氨基就会和羧基反应了,而且我怎么感觉有问题啊,你确定是活化BSA上的羧基吗?如果我没记错的话,BSA是有氨基的,你是不是讲BSA和小分子弄反了。

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-03-25 23:41:47
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luolilan

银虫 (正式写手)

2楼2016-03-25 22:43:36
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luolilan

银虫 (正式写手)

3楼2016-03-25 22:43:58
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weiwei619

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luolilan at 2016-03-25 22:43:36
偶联什么

活化BSA蛋白质上的羧基,与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化,再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的?
4楼2016-03-25 23:17:59
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