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weiwei619

金虫 (小有名气)

[求助] EDC/NHS偶连实验,如何在两种缓冲溶液中转换?谢谢! 已有3人参与

我在做EDC/NHS偶连实验,但是看文献中缓冲溶液是先在MES(ph=4-6)中活化,然后在PBS里偶联。我不明白我的材料如何在两种缓冲溶液中转换?求大神指导!谢谢!
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luolilan

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-25 23:17:59
活化BSA蛋白质上的羧基,与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化,再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的?...

PBS的作用就是为了保护蛋白的啊,不然可以直接用水不是吗?所以,我猜应该是活化小分子染料上的羧基,之后再将BSA溶解在PH等于7.4的PBS中,利用蛋白上的氨基与活化后的羧基反应,反正我做的实验是这样的步骤,不知道为何你的是反的

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-03-25 23:49:43
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luolilan

银虫 (正式写手)

2楼2016-03-25 22:43:36
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luolilan

银虫 (正式写手)

3楼2016-03-25 22:43:58
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weiwei619

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luolilan at 2016-03-25 22:43:36
偶联什么

活化BSA蛋白质上的羧基,与带氨基的小分子染料偶联。文献中是说EDC,NHS和蛋白质先在ph=4-6的缓冲溶液中活化,再在PH=7.4的PBS中进行偶联。实在不会两种溶液怎么换的?
4楼2016-03-25 23:17:59
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