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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » EDC/NHS偶连实验，如何在两种缓冲溶液中转换？谢谢！
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weiwei619

金虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by luolilan at 2016-03-25 23:49:43
PBS的作用就是为了保护蛋白的啊，不然可以直接用水不是吗？所以，我猜应该是活化小分子染料上的羧基，之后再将BSA溶解在PH等于7.4的PBS中，利用蛋白上的氨基与活化后的羧基反应，反正我做的实验是这样的步骤，不知 ...

小分子在MES中，而BSA在PBS中，这两者混一起那不是既有MES又有PBS，而且可能整体PH值也变了吧，感觉好乱
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11楼2016-03-26 09:56:47
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luolilan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-26 09:56:47
小分子在MES中，而BSA在PBS中，这两者混一起那不是既有MES又有PBS，而且可能整体PH值也变了吧，感觉好乱...

小分子是带氨基的吗

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12楼2016-03-26 09:58:58
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weiwei619

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by luolilan at 2016-03-26 09:58:58
小分子是带氨基的吗
...

是的，小分子带氨基，BSA用戊二醛交联，可能会反应一部分氨基，
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13楼2016-03-26 10:03:59
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luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-26 10:03:59
是的，小分子带氨基，BSA用戊二醛交联，可能会反应一部分氨基，...

那我就不知道是应该是活化的时候加小分子氨基，还是活化后了，因为你活化的是蛋白上的羧基，你看的是英文文献吧

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14楼2016-03-26 10:10:23
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luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-26 10:03:59
是的，小分子带氨基，BSA用戊二醛交联，可能会反应一部分氨基，...

有告诉你活化多长时间吗？

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15楼2016-03-26 10:13:35
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luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by weiwei619 at 2016-03-26 10:03:59
是的，小分子带氨基，BSA用戊二醛交联，可能会反应一部分氨基，...

我活化羧基的时候是用PH等于5的PBS缓冲液活化的

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16楼2016-03-26 10:24:16
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707607506

新虫 (小有名气)
你的那个溶液是活化用的，主要目的产生羧基，然后与氨基进行羧氨反应

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17楼2016-03-28 11:13:14
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长江鱼12

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
MES活化好，过一个G25更换缓冲液，妥妥的
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18楼2016-03-28 14:54:02
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zhangwu58

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
19楼2016-04-09 14:19:03
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luolilan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by zhangwu58 at 2016-04-09 14:19:03
您好如果活化的时候氨基和羧基放在一起了，会影响反应吗？谢谢...

会啊，有氨基就直接反应了呗

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20楼2016-04-09 16:31:15
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