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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒DNA酶切后PCR检测
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i760912798

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒DNA酶切后PCR检测 已有4人参与

质粒DNA酶切后PCR检测，我想知道酶切完必须立刻PCR吗？如果酶切不完全怎么办？
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1楼 2016-03-20 11:04:38
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生物小虫虫

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
1楼: Originally posted by i760912798 at 2016-03-20 11:04:38
质粒DNA酶切后PCR检测，我想知道酶切完必须立刻PCR吗？如果酶切不完全怎么办？

一般都是安试剂盒步骤走的呀，怎么会酶切不完全。反正我都是立即就pcr的，从来没等过。

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2楼2016-03-20 11:16:58
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-03-27 08:10:06
不清楚你这样做的实验目的是什么？只是验证克隆的话，为什么要质粒酶切了再pcr验证，和不酶切进行pcr结果有什么区别呢？菌液pcr或者提取质粒不酶切进行pcr不可以么？

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
3楼2016-03-20 12:05:25
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hua_geduo

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

与楼上同问，不知道你这样做的目的是什么
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4楼2016-03-24 16:46:07
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任我逍遥江南

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

酶切完后，用纯化试剂盒做个纯化就好

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5楼2016-03-27 02:39:00
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牛红

木虫 (小有名气)
酶切后做pcr？为啥这样做？如果是希望酶切后双引物pcr无条带的话，那很容易假阳性的，因为难保酶切完全，pcr太灵敏了

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赢得不够是因为心智还不够高远
6楼2016-03-27 08:11:40
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饺子弟

铜虫 (小有名气)
正常顺序应该是先做pcr验证，正确的克隆才会进一步做酶切验证吧！而且酶切产物也不能直接用于扩增吧。

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7楼2016-03-27 08:14:14
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