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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒载体构建的详细步骤
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dd812007135

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒载体构建的详细步骤 已有1人参与

小弟是个菜鸟，有哪位大侠能贡献下关于质粒载体构建的详细步骤。下面是我目前了解的一些资料，请大侠指教一下，谢谢。
    1.培养含质粒的大肠杆菌，过夜后抽提质粒
    2.PCR扩增目的片段，电泳检测后，切胶获取目的片段
    3.酶切目的片段和质粒，电泳检测酶切位点
    4.连接，获取重组DNA
    5.转化感受态细胞，培养
    6.培养板筛选，PCR鉴定
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1楼 2015-07-28 22:26:46
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混合配搭

新虫 (小有名气)
顶 我也想学习一下

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-07-29 06:36:49
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烟雨莫问

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dd812007135(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:02:16
基本上就是这个过程。电泳检测的是你的线性化的载体，并不是检测你的酶切位点。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-07-29 09:14:16
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穆圣

金虫 (正式写手)
顶 我也想学习一下
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自由的追求者
4楼2015-07-31 12:26:41
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leituoyuhua

新虫 (小有名气)
你好，我也是刚接触这一部分，你现在有这方面的详细步骤和方法资料了吗？能给我分享一下吗？非常感谢！！
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女生读研究生真累！！！
5楼2015-08-08 16:57:03
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no1xiaowu

新虫 (初入文坛)
LZ，这个有需要第2步的PCR扩增吗？
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6楼2015-08-09 10:46:51
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