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iptg诱导大肠杆菌表达 已有2人参与
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我做了重组质粒，一个蛋白和荧光蛋白的结合，然后转导到大肠杆菌中。 用iptg诱导载体质粒表达，蛋白和荧光蛋白结合的产物。 但现在出现了大肠杆菌不游动的情况。 经过一些实验验证，发现加入iptg的时候，od的值对结果有一定影响。 但是还是没有达到想要的结果，游动虽然有，但还是不正常。 想问iptg诱导，诱导的时间点和温度对细菌表达可溶性蛋白的产物有多大影响？ 求各位大神解答～ 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2016-03-17 13:43:14
3楼2016-03-17 16:59:00
nyjznj2010
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4楼2016-03-17 17:11:20
送红花一朵 |
我的目的并不是提取蛋白质，大肠杆菌是我的研究对象，我是要融合蛋白在大肠杆菌中表达并且不会影响大肠杆菌的基本性质。 现在的情况是，我观察到了大肠杆菌不游，确认如果在od较大时，加入iptg，大肠杆菌不游的情况会改善。 我可以试着测测生长曲线，在对数期加入。 谢谢~ 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2016-03-17 17:55:12
6楼2016-03-17 17:56:53
nyjznj2010
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7楼2016-03-18 10:56:10
nyjznj2010
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8楼2016-03-18 10:57:24
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在od较大时，积累了大量菌体，所以此时加iptg，蛋白表达量较高。 是指每个菌体表达蛋白量不变，而由于菌体数目增多，导致整体蛋白表达量较高，还是每个菌体在接受iptg不同诱导时间，自身所产生的蛋白量也会发生变化？~ 发自小木虫IOS客户端 |
9楼2016-03-18 11:07:47
10楼2016-03-19 10:20:09