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lcjiaojiao

新虫 (小有名气)

[求助] 液相不出峰的原因已有7人参与

做舒尼替尼液相,C18柱,流动相为乙腈:水=65;35,流速为1ml/min,进样40分钟后仍未出峰,只有溶剂峰,求助各位大神可能的原因有哪些?
调整流动相极性,乙腈100%,终于出峰了,但是出峰特别小是为什么?怎么改善呢?标准品浓度为0.2mg/ml

液相不出峰的原因
液相.jpg
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ly2199

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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lcjiaojiao: 金币+2 2016-03-30 16:44:29
引用回帖:
7楼: Originally posted by lcjiaojiao at 2016-03-14 13:04:52
安捷伦1260,检测器为紫外。
请问波长可以超过400nm吗?...

如果HPLC用的紫外检测器的话,首先得通过UV-Vis测试一下样品溶液的最大吸收波长,吸收波长设定不合适的话,对于你样品的灵敏度影响非常大,也就是你说的样品特别小的问题。
关于流动相比例问题,你开始用的是65%的乙腈,那你有没有试过80%的乙腈?如果没有的话,可以试一下。再就是你的C18柱子是多长的?如果是25cm的话,可以换一根短一点的柱子。
9楼2016-03-14 14:49:31
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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lcjiaojiao: 金币+2 2016-03-30 16:46:10
原流动相不变,水相加0.3%三氟乙酸试试。

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-03-14 11:09:30
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

首先,这个方法以前有人用过吗?能确定是出峰的吗?
其次,可以调整pH、加缓冲盐。你可以查查文献,参考一下别人的方法。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
3楼2016-03-14 11:54:18
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wenwang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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lcjiaojiao: 金币+2 2016-03-30 16:46:20
不知道你用的什么检测器,是不是检测器没调好啊.
4楼2016-03-14 12:06:14
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