| 查看: 1404 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于t载体的连接求助 已有1人参与
|
||
|
在实验室实习，看到takara公司的pmd19T载体说明书上说16℃连接三十分钟，而实验室的师兄师姐都是过夜连接？差别大么？如果时间比较赶该怎么做？谢谢各位！ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有65人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助求助！转录因子的克隆！
已经有8人回复
- 关于pET32a载体构建后，双酶切鉴定不正确~求助
已经有10人回复
- 实验问题求助，关于可变剪切的
已经有2人回复
- 【求助/交流】关于质粒转化，求高手指导！！（附图）
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于基因方面的实验
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于T载体连接问题
已经有22人回复
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
4楼2016-03-06 18:22:16
ddt123456789
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 416.7
- 帖子: 29
- 在线: 16.8小时
- 虫号: 3537975
- 注册: 2014-11-15
- 专业: 力学中的基本问题和方法
|
过夜连接差别不大，都是利用taq在扩增时末端多出来一个A和载体上的T互补配对，连接的体系会达到一个动态平衡，一般公司推荐的连接时间会有些富余，你可以试试缩短时间，看最终连接效果摸出一个能接受的最短时间。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-06 17:05:56
3楼2016-03-06 17:56:08
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
零星风前絮: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-06 22:10:03
感谢参与，应助指数 +1
零星风前絮: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-06 22:10:03
|
这个连接还是要看个人习惯和实验安排的，我们用过22连接一到两个小时的，照样可以达到实验需要，这和具体实验有关。克隆做多了，熟练了，就不会纠结这么些细节了，时间紧就缩短点时间，安排不过来就放过夜，大部分人选择过夜主要是用一些T4连接酶保留的习惯，到T载也懒得改，对实验影响也不大。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-06 19:42:41
