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求助求助！转录因子的克隆！
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目前我的研究方向是关于调控异黄酮合成的转录因子的功能研究，已确定一MYB类的转录因子（CDS:1008bp)进行克隆，该转录因子AT含量较高，经克隆后连接pMD18-T载体进行测序，共测序3次，9个样品，9个测序结果均是在转录因子前274bp左右的片段存在大量非特异性扩增片段，报告显示该区域存在高级结构。274bp-1008bp的测序序列与原序列基本一致，9个测序样品之间的Identity达到99.5%以上。将测序序列输入NCBI进行BLAST比对，结果均为我要克隆的转录因子。 现请教：根据测序结果，我是否可以采用测序序列继续进行下一步试验？存在高级结构是否会对转录因子的翻译产生影响？还是重新克隆该转录因子？如何能够获得与原序列一致的片段？ |
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crescent010
铁虫 (初入文坛)
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- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2015-05-11 16:06:07