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求助求助!转录因子的克隆!
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目前我的研究方向是关于调控异黄酮合成的转录因子的功能研究,已确定一MYB类的转录因子(CDS:1008bp)进行克隆,该转录因子AT含量较高,经克隆后连接pMD18-T载体进行测序,共测序3次,9个样品,9个测序结果均是在转录因子前274bp左右的片段存在大量非特异性扩增片段,报告显示该区域存在高级结构。274bp-1008bp的测序序列与原序列基本一致,9个测序样品之间的Identity达到99.5%以上。将测序序列输入NCBI进行BLAST比对,结果均为我要克隆的转录因子。 现请教:根据测序结果,我是否可以采用测序序列继续进行下一步试验?存在高级结构是否会对转录因子的翻译产生影响?还是重新克隆该转录因子?如何能够获得与原序列一致的片段? |
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crescent010
铁虫 (初入文坛)
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