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关于t载体的连接求助 已有1人参与
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在实验室实习，看到takara公司的pmd19T载体说明书上说16℃连接三十分钟，而实验室的师兄师姐都是过夜连接？差别大么？如果时间比较赶该怎么做？谢谢各位！ 发自小木虫Android客户端 |
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3楼2016-03-06 17:56:08
ddt123456789
新虫 (初入文坛)
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- 专业: 力学中的基本问题和方法
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过夜连接差别不大，都是利用taq在扩增时末端多出来一个A和载体上的T互补配对，连接的体系会达到一个动态平衡，一般公司推荐的连接时间会有些富余，你可以试试缩短时间，看最终连接效果摸出一个能接受的最短时间。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-06 17:05:56
jackyoung
新虫 (正式写手)
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4楼2016-03-06 18:22:16
原海亮
木虫 (著名写手)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
零星风前絮: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-06 22:10:03
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零星风前絮: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-03-06 22:10:03
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这个连接还是要看个人习惯和实验安排的，我们用过22连接一到两个小时的，照样可以达到实验需要，这和具体实验有关。克隆做多了，熟练了，就不会纠结这么些细节了，时间紧就缩短点时间，安排不过来就放过夜，大部分人选择过夜主要是用一些T4连接酶保留的习惯，到T载也懒得改，对实验影响也不大。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-06 19:42:41
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