24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 716  |  回复: 5

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 构载体,转T载体出现错误。 已有2人参与

在构载体的时候,设计引物在目的基因CDS区两端加上酶切位点(KpnI/BamHI),pcr 位置条带也对(1500bp左右),但是回收纯化转DH5α,挑出的菌做菌落pcr却显示条带<1000bp(条带很亮),提质粒进行酶切也没有切出来,不知道什么原因,也不知道怎么解决。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yvonne9044

新虫 (正式写手)

我觉得可以测序看看,个人意见

发自小木虫Android客户端
2楼2016-03-03 13:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:25
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:38
先确定CDS中间和质粒上没有同样的酶切位点,如果没有多挑克隆看看,应该有你要的克隆
3楼2016-03-05 09:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2016-03-05 09:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoluoquan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:52
酶切都酶切出来说明没连上,PCR鉴定时的条带是非特异。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-03-05 13:45:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx1314521

新虫 (初入文坛)

你好,能分享下关于设计CDS区引物的心得不?还有个问题,之前pcr可以扩增出很亮的条带,再pcr的时候就p出的条带很弱甚至没有了,所有的条件和用品都是一样的,很纠结

发自小木虫Android客户端
6楼2016-03-17 08:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangyang1991 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 本科211,293分请求调剂 +3 莲菜就是藕吧 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:34 by lbsjt
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 298分 070300求调剂 +11 zwen03 2026-04-02 11/550 2026-04-03 10:19 by macy2011
[考研] 调剂 +7 祉岷. 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:11 by 花呗还欠600
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +6 兔兔兔111223314 2026-03-29 8/400 2026-04-02 22:37 by louise0220
[考研] 085600调剂 +3 1amJJ 2026-04-02 3/150 2026-04-02 22:00 by 科研小专家
[考研] 277求调剂 +3 12A3 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:30 by swb0218
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +7 王一一依依 2026-03-30 9/450 2026-04-02 21:15 by 1104338198
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 290求调剂 +5 dfffsar 2026-03-29 5/250 2026-04-01 19:45 by 6781022
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 英一数二生物信息学287分,本科生物科学,求调剂 +3 碧水xyz 2026-03-29 4/200 2026-04-01 15:35 by plum
[考研] 求调剂:085600材料与化工,考材科基,总分319 +17 678lucky 2026-03-31 21/1050 2026-04-01 01:40 by 1018329917
[考研] 289求调剂 +7 BrightLL 2026-03-29 7/350 2026-03-31 22:05 by 544594351
[考研] 375求调剂 +7 雨夏整夜 2026-03-29 7/350 2026-03-31 18:52 by xhai2011
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
信息提示
请填处理意见