24小时热门版块排行榜    

查看: 712  |  回复: 5

yangyang1991

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 构载体,转T载体出现错误。 已有2人参与

在构载体的时候,设计引物在目的基因CDS区两端加上酶切位点(KpnI/BamHI),pcr 位置条带也对(1500bp左右),但是回收纯化转DH5α,挑出的菌做菌落pcr却显示条带<1000bp(条带很亮),提质粒进行酶切也没有切出来,不知道什么原因,也不知道怎么解决。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yvonne9044

新虫 (正式写手)

我觉得可以测序看看,个人意见

发自小木虫Android客户端
2楼2016-03-03 13:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:25
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:38
先确定CDS中间和质粒上没有同样的酶切位点,如果没有多挑克隆看看,应该有你要的克隆
3楼2016-03-05 09:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2016-03-05 09:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aoluoquan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yangyang1991: 金币+1, 有帮助 2016-03-05 23:39:52
酶切都酶切出来说明没连上,PCR鉴定时的条带是非特异。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-03-05 13:45:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx1314521

新虫 (初入文坛)

你好,能分享下关于设计CDS区引物的心得不?还有个问题,之前pcr可以扩增出很亮的条带,再pcr的时候就p出的条带很弱甚至没有了,所有的条件和用品都是一样的,很纠结

发自小木虫Android客户端
6楼2016-03-17 08:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangyang1991 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
请填处理意见